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    BrdU 細胞增殖檢測試劑

    來源: 天津百螢生物科技有限公司   2018-10-8   訪問量:822評論(0)

    基本信息

    貨號:1703025 mg

    儲存方式:-20℃避光

    結構式:

    分子量:307.09

    外觀:白色

    儲存:DMSO

    生物應用

    5--2-脫氧尿苷(BrdU)是胸苷的類似物,可以摻入新合成的復制細胞DNAS期細胞)中。 BrdU通常用于檢測活組織中的增殖細胞。 它通過在DNA復制過程中取代胸苷并將其自身整合到新合成的DNA中(在S期期間)起作用。 然后可以使用對BrdU特異的抗體來檢測摻入的化學物質,從而指示活躍地復制其DNA的細胞。 因為BrdU可以在細胞分裂的S期中替代胸苷,它可以引起突變。

    染色細胞樣本分析

    以下程序適用于大多數細胞類型。生長培養基,細胞密度,其他細胞類型的存在和其他因素可能影響Brdu摻入。

    1)。 制備1-10mM DMSO儲備溶液。 如果儲存在-20°CDMSO儲備溶液可以使用6個月。

    2)。 通過離心沉淀細胞并將細胞重懸于完全生長的培養基中。 培養物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養孔中原位染色。

    3)。 使用520μM之間的濃度添加Brdu染色,并將其孵育60分鐘至過夜。 最佳孵育時間取決于細胞類型和實驗目標。

    4)。 用70-80%酒精或酸 - 乙醇固定細胞20-30分鐘。

    5)。用PBS洗滌(3次,每次2分鐘)。

    6)。 繼續進行免疫細胞化學染色。

    參考文獻

    1. Zeng Y, Wang Y. (2006) Sequence-dependent formation of intrastrand crosslink products from the UVB irradiation of duplex DNA containing a 5-bromo-2'-deoxyuridine or 5- bromo-2'-deoxycytidine. Nucleic Acids Res.

    2. Kuwagata M, Ogawa T, Nagata T, Shioda S. (2006) The evaluation of early embryonic neurogenesis after exposure to the genotoxic agent 5-bromo-2'-deoxyuridine in mice. Neurotoxicology.

    3. Sahambi SK, Hales BF. (2006) Exposure to 5-bromo-2'-deoxyuridine induces oxidative stress and activator protein-1 DNA binding activity in the embryo. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 76, 580.



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